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Cong茅lation protocolCell monocouches cultures ont 茅t茅 fournis avec un milieu de culture frais 30 min avant de les congeler. des flacons de culture / plaques ont 茅t茅 plac茅es dans un bain de circulation r茅frig茅r茅 (5 ? 20 (Neslab Instruments, Newington, NH, USA) pendant 20 min. Apr猫s 5 min de refroidissement (2 ? 5 temp茅rature de l'茅chantillon), la nucl茅ation de la glace a 茅t茅 initi茅e dans chaque puits d'茅chantillon en contact avec une sonde m茅tallique froid. 茅chantillons ont 茅t茅 maintenus pendant 15 min restant ? leurs temp茅ratures respectives. suite de l'intervalle de gel de 20 min, des 茅chantillons ont 茅t茅 pr茅lev茅s et d茅congel茅es ? temp茅rature ambiante pendant 15 min. 茅chantillons sont ensuite retourn茅s ? 37 dans une culture cellulaire configuration de gel incubateur pour permettre la r茅cup茅ration. Plate a 茅t茅 utilis茅 pour des essais de viabilit茅 et de la configuration du flacon a 茅t茅 utilis茅 pour les deux 茅tudes mol茅culaires et les 茅tudes de viabilit茅 des cellules correspondantes.
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Carol Kemp, une infirmi猫re de l'茅cole dans la communaut茅 essentiellement agricole de Hollister, d茅fend les lettres, qui 茅taient son id茅e. 芦L'ann茅e derni猫re nous avions fait quelques parents nous remercient pour les lettres."
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