HEK293Tでのルシフェラーゼアッセイについて

2：みずほ：2010/07/22(木) 01:41:24: リガンドを接触させていないサンプル･･･、というのはTLRs,NLRsを発現させた細胞が発現させなかった細胞にくらべてNF-ｋBの活性化が起きるということですか？
そうでしたら、それはむしろ普通です。TLRsやNLRsを過剰発現させればリガンドがなくてもNF-ｋB活性化がおきます。
リガンドを加えればさらにNF-ｋBの活性化が起こるはずですが、ただ、過剰発現させすぎるとリガンドによるinductionは見にくくなります。
とはいっても、発現が低すぎても活性化が弱くなります。
だから細菌の刺激活性を調べたいのであれば、まずは精製リガンドを使っていちばんinductionが見やすい条件を、TLRsやNLRsの導入量をふって検討してみる必要があります。

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